Different times to perform timed artificial insemination when using a P4/E2/eCG-based protocol in buffalo / Momentos diferentes para executar a inseminação artificial em tempo fixo utilizando o protocolo à base de P4/E2/eCG em búfalas

ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate different times for timed artificial insemination (TAI) in buffalo submitted to a P4/E2/eCG-based protocol. In this study, 204 buffaloes were distributed into one of two groups (TAI56, n=103 and TAI64, n=101). At a random stage of the oestrous cycle (Day 0 = D0), in the morning (TAI56, a.m.) or afternoon (TAI64, p.m.), buffaloes received an intravaginal progesterone device (P4; 1.0 g) plus EB (2.0 mg i.m.). On D9 a.m. (TAI56) or p.m. (TAI64), the P4 was removed and buffaloes received PGF2a (0.53 mg i.m. sodium cloprostenol) and eCG (400 IU i.m.). On D10 a.m. (TAI56) or p.m. (TAI64), 24 h after P4 removal, buffaloes were treated with EB (1.0 mg i.m.). Buffaloes from TAI56 and TAI64 were inseminated 56 and 64 h after P4 removal (D11, p.m. and D12, a.m., respectively). Ultrasound examinations were performed on D0 to ascertain ovarian follicular status, at TAI to measure the diameter of the dominant follicle (DF) and D42 for pregnancy diagnosis. The statistical analysis was performed using the GLIMMIX procedure of SAS®. There was no difference between TAI56 and TAI64 for the diameter of the DF at TAI and the pregnancy per TAI. It was concluded that TAI 56 or 64 h after P4 removal did not affect fertility in buffaloes submitted to the induction of ovulation with EB. The present research supports that is possible to perform TAI at any time throughout the day in buffalo synchronized during the non-breeding season.

RESUMO: O objetivo deste estudo foi avaliar diferentes momentos para a realização da IATF em búfalas submetidas a um protocolo à base de P4/E2/eCG. Neste estudo, 204 búfalas foram distribuídas em um de dois grupos (IATF56, n=103 e IATF64, n=101). Em estágio aleatório do ciclo estral (Dia 0 = D0), pela manhã (IATF56, manhã) ou pela tarde (IATF64, tarde), as búfalas receberam um dispositivo intravaginal de progesterona (P4; 1,0 g) e BE (2,0 mg i.m.). No D9 pela manhã (IATF56) ou pela tarde (IATF64), a P4 foi removida e as búfalas receberam PGF2a (0,53 mg i.m. cloprostenol sódico) e eCG (400 UI i.m.). No D10 pela manhã (IATF56) ou pela tarde (IATF64), 24 h após a remoção da P4, as búfalas foram tratadas com BE (1,0 mg i.m.). As búfalas dos grupos IATF56 e IATF64 foram inseminadas 56 e 64 h após a remoção da P4 (D11, pela tarde e D12, pela manhã, respectivamente). Avaliações ultrassonográficas foram realizadas no D0 para verificar o status folicular ovariano, na IATF para medir o diâmetro do folículo dominante (FD) e no D42 para o diagnóstico de gestação. A análise estatística foi realizada utilizando o procedimento GLIMMIX do SAS®. Não houve diferença entre os grupos IATF56 e IATF64 no diâmetro do FD na IATF e na prenhez por IATF. Conclui-se que a IATF 56 ou 64 h após a remoção da P4 não afeta a fertilidade de búfalas submetidas à indução da ovulação com BE. A presente pesquisa evidencia que é possível realizar a IATF durante todo o dia em búfalas sincronizadas durante a estação reprodutiva desfavorável.

Progesterone production in superovulated holstein heifers and in crossbred recipient of embryo supplemented with betacarotene and tocopherol / Produção de progesterona em novilhas Holandesas superovuladas e receptoras de embrião mestiças suplementadas com betacaroteno e tocoferol

Two experiments were conducted to evaluate the effect of the intramuscular injection of betacarotene associated to tocopherol on the plasma concentration progesterone of superovulated Holstein heifers (experiment 1) and in crossbred (Bos taurus x Bos indicus) heifers submitted to fixed-time embryo transfer (FTET, experiment 2). In experiment 1, after estrus synchronization and superovulation animals were inseminated 12 and 24 hours after estrus onset and embryos flushed 7 days later. Heifers were allocated randomly to one of three treatments: Control; T800 (800 mg of betacarotene plus 500 mg of tocopherol) and T1200 (1,200 mg of betacarotene plus 750 mg of tocopherol). The treatments were given on the day of ear implant placement and repeated on the first day of superovulation. Blood samples were collected on D0, D5, D9, D12 and D16. In experiment 2, treatments were imposed at intravaginal device insertion (D0). The same experimental design, as in experiment 1, was used. Blood samples were collected on D17 (embryos implanted) for progesterone determination by radioimmunoassay. In experiment 1, average plasma progesterone concentrations after corpora lutea formation (D12 plus D16 means) were 13.7±1.8 ng/ml, 14.5±2.3 ng/ml and 10.8±2.3 ng/ml for control, T800 and T1200, respectively, and did not differ (P=0.44). In experiment 2, progesterone concentrations on D17 in Control (8.88±0.57 ng/ml), T800 (7.48±0.64 ng/ml) and T1200 (5.90±1.33 ng/ml) groups were similar (P=0.11). Results indicate that the supplemental betacarotene and tocopherol injections did not influence peripheral progesterone concentrations in superovulated Holstein donors and crossbreed recipients heifers.

Dois experimentos foram conduzidos para avaliar o efeito da injeção intramuscular de betacaroteno associada ao tocoferol, na concentração plasmática de progesterona de novilhas Holandesas superovuladas (Experimento 1) e em novilhas cruzadas (Bos taurus x Bos indicus) submetidas à transferência embrionária em tempo fixo (TETF, experimento 2). No experimento 1, após a sincronização do estro e superovulação, os animais foram inseminados entre 12 a 24 h após o início do estro e os embriões recuperados após 7 dias. As novilhas foram divididas, aleatoriamente, em 1 de 3 tratamentos: Controle (duas injeções de soro); T800 (800 mg de betacaroteno mais 500 mg de tocoferol) e T1200 (1.200 mg de betacaroteno mais 750 mg de tocoferol). Os tratamentos foram administrados no dia da colocação do implante de progesterona e repetido no primeiro dia da superovulação. As colheitas de sangue foram realizadas no D0, D5, D9, D12 e D16. No experimento 2, os tratamentos foram realizados no momento da inserção do dispositivo de progesterona (D0). Utilizou-se o mesmo delineamento do experimento 1. A colheita de sangue para a determinação da progesterona por radioimunoensaio foi realizada no D17 (inovulação embrionária). No experimento 1, a concentração plasmática média, após formação do corpo lúteo (média da soma de D12 com D16) foi de 13,7±1,8 ng/ml, 14,5±2,3 ng/ml e 10,8±2,3 ng/ml para os grupos Controle, T800 e T1200, respectivamente, e não diferiram (P=0,44) entre os tratamentos. No experimento 2, a concentração de progesterona nas receptoras, no dia 17, foi semelhante (P=0,11) entre os grupos controle (8,88±0,57 ng/ml), T800 (7,48±0,64 ng/ml) e T1200 (5,90±1,33 ng/ml). Os resultados indicaram que as injeções de suplemento com betacaroteno e tocoferol não influenciaram na concentração plasmática de progesterona em novilhas Holandesas doadoras de embriões e em novilhas cruzadas, receptoras de embrião.

Redução da primeira dose de GnRH em vacas holandesas de alta produção sincronizadas com Ovsynch ou Heatsynch / Reduction of first GnRH dosage in high-yielding holstein cows synchronized with Ovsynch or Heatsynch

The objective of this study was to evaluate the effect of treatment with 10 or 20 μg of GnRH and type of FTAI protocols (Ovsynch and Heatsynch) on pregnancy rate of lactating dairy cows submitted to the synchronization at FTAI (n = 581). The animals were distributed among four treatments, allocated factorial design 2x2: Treat 1- Ovsynch (20 μg GnRH on D0; PGF on D7; 10 μg GnRH on D9 and FTAI on D10; n = 141), Treat 2- ½ Ovsynch (10 μg GnRH on D0; PGF on D7; 10 μg GnRH on D9 and FTAI on D10; n = 159), Treat 3- Heatsynch (20 μg GnRH on D0; PGF on D7; 1 mg EB on D8 and FTAI on D10; n = 147) and Treat 4- ½ Heatsynch (10 μg GnRH on D0; PGF on D7; 1 mg EB on D8 and FTAI on D10; n = 134). The Group Ovsynch (Treat 1 and 2) presented greater pregnancy rate than Group Heatsynch (Treat 3 and 4) at 28 days (45.7% (137/300) and 39.9% (112/281), respectively; P = 0.07) and at 56 days of gestation (41.0% (123/300) and 34.2% (96/281), respectively; P = 0.06). There were no statistical difference (P > 0.10) on pregnancy rate at 28 (44.4% (128/288) vs 41.3% (121/293); P = 0.50) and 56 days (38.2% (110/288) vs 37.2% (109/293); P = 0.68) between the dosages of the GnRH. The pregnancies losses (between 28 and 56 days) were not different between the FTAI protocols and GnRH dosage (P > 0.10). We concluded that the Ovsynch protocol presented greater pregnancy rate at FTAI than Heatsynch protocol and the administration of 10 μg of buserelin Acetate, at the beginning of these protocols did not decrease the efficiency of FTAI protocols in high-yielding Holstein cows.

O objetivo desse estudo foi avaliar o efeito da redução da primeira dose de GnRH (10 vs 20 μg) e do tipo de protocolo de sincronização para a IATF (Ovsynch e Heatsynch) na taxa de prenhez de vacas holandesas de alta produção sincronizadas para IATF (n = 581). Os animais foram distribuídos entre os tratamentos e alocados em arranjo fatorial 2x2, sendo: Trat 1- Ovsynch (20 μg GnRH no D0; PGF no D7; 10 μg GnRH no D9 e IATF no D10; n = 141), Trat 2- ½ Ovsynch (10 μg GnRH no D0; PGF no D7; 10 μg GnRH no D9 e IATF no D10; n = 159), Trat 3- Heatsynch (20 μg GnRH no D0; PGF no D7; 1 mg BE no D8 e IATF no D10; n = 147) e Trat 4- ½ Heatsynch (10 μg GnRH no D0; PGF no D7; 1 mg BE no D8 e IATF no D10; n = 134). O Grupo Ovsynch (Trat 1 e 2) apresentou maior taxa de prenhez que o grupo Heatsynch (Trat 3 e 4) aos 28 dias (45,7% (137/300) e 39,9% (112/281), respectivamente; P = 0,07) e aos 56 dias de gestação (41,0% (123/300) e 34,2% (96/281), respectivamente; P = 0,06). A dose de GnRH, não influenciou (P > 0.10) a taxa de prenhez aos 28 dias (44,4% (128/288) vs 41,3% (121/293); P = 0,50) e aos 56 dias (38,2% (110/288) vs 37,2% (109/293); P = 0,68) entre os grupos tratados com 10 μg ou 20 μg de acetato de buserelina. As perdas gestacionais (ente 28 e 56 dias) não diferiram entre os protocolos para IATF e dose de GnRH (P > 0,10). Conclui-se que, protocolo Ovsynch apresentou maior taxa de prenhez à IATF que o Heatsynch e a administração de 10 μg de Acetato de Buserelina no início dos tratamentos de sincronização não comprometeu a eficiência do protocolo de sincronização para IATF em vacas holandesas de alta produção.